图1
图2
图2中的HE切片出现褪色的问题
工作中大家是否经过遇到过?
为什么会出现这样的问题呢?
我们该如何处理呢?
存放较久的HE切片容易褪色,常见褪色原因及处理方式如下:
1、取材时的组织块偏大、偏厚,导致固定不佳,适宜大小应为2.0cmX1.5cmx(0.2cm-0.3cm)。
2、固定液pH不适宜,推荐使用中性福尔马林固定液,**pH7.2-7.4;组织也不宜固定过久,固定时间不能超过72h。
3、脱水前组织流水冲洗不彻底。
多方比较,建议购买市场认可度高的商品成品。
1、染液及所用试剂酸碱度不适宜,用碱性过大的溶液返蓝,易引起胞质褪色,推荐使用pH7.5-8的弱碱性溶液返蓝,并经自来水彻底冲洗。
2、伊红染液中加入冰醋酸(促染剂)过多,导致染色结果保持时间短,推荐每100ml伊红染液加1-2滴冰醋酸较好。(可摇动染色容器,若发现大量泡沫浮在液面、且较长时间不消失,说明染液内冰醋酸过多)
如无水乙醇使用次数过多后,含较多水分,应根据染色片量或者使用时间来动态更换。本科室设定染色片量达500张或使用时间超过一周时更换无水乙醇。
切片内含水分、气泡,封固剂用量不当可致切片易褪色。建议在潮湿天气封片时,开启空调或抽湿机除湿,也可在最后一缸二甲苯后增加一缸苯酚。(注意苯酚有毒、有腐蚀性,使用时要做好防护措施)
封固剂中的二甲苯,时间过长时易氧化生成苯甲酸和邻苯二甲酸而呈酸性,可导致苏木精褪色,应使用中性封固剂,可在封固剂中放少量大理石或无水碳酸钠,置低温干燥箱内,充分搅拌待澄清后,取上清液应用。
病理资料室应设置在阴凉通风区,室温不能过高,室内不能过于潮湿,可开启空调或抽湿机等设备,保持室内适度干燥;应避光保存,避免强光照射。
备注:
本文转载至公众号:赣州市肿瘤医院病理科
主要来源于病理技术大讲堂-----1001问